日前，中国科学院院士、新葡的京集团3512vip网站陈义汉教授等学者在国际权威刊物《美国化学会志》（Journal of the American Chemical Society）上发表了题为“基于UdgX的在单碱基分辨率水平上的DNA脱氧尿嘧啶的检测技术”的研究论文。借助“UdgX”这种特殊的酶分子，这项研究发明了灵敏性好、特异性强和分辨率高的DNA脱氧尿嘧啶（dU）检测技术，第一次用酶法在单碱基分辨率水平上精准检测DNA中的dU，实现了DNA中dU碱基检测技术的根本性突破。

众所周知，DNA是生物体的遗传密码。通常认为它们包括腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、鸟嘌呤（G）和胞嘧啶（C）四个碱基。后来的研究发现，DNA中还存在另外的碱基dU。这些碱基共同组成了DNA的基本元素。但是，迄今为止，人类还难以从单个碱基分辨率水平上检测到dU。这构成了DNA序列检测的盲区和瓶颈之一，严重阻碍了对dU的功能的认知和对DNA遗传密码的理解。

从原核生物到真核生物，从单细胞生物到人类，除外A、T、G和C，它们的DNA中还包含着比例不等的dU。在艾滋病毒的DNA中，每二十个碱基就有一个以上的dU；而在疟原虫的DNA中，dU占碱基的比例大约为十万分之一。dU既能通过C碱基脱氨产生，又能“冒充”T碱基掺入到基因组中。由于缺乏敏感又特异的单碱基分辨率的dU测序技术，迄今为止人类并没有像其它碱基（A、T、G和C）那样实现dU在DNA中的精准定位。也就是说，现在的dU检测技术可以证实若干碱基中存在dU碱基，但是并不能确定dU碱基位于什么样的具体的碱基之间。

同时，dU具有双面性，它有时充当人类健康的朋友，有时又可能是人类健康的敌人。许多研究发现，当机体面对不同抗原时，免疫细胞需要dU作为中间体，产生多种多样的抗体，帮助抵御诸如新冠病毒之类的病原体对人类的侵害。而当肿瘤或者心血管疾病患者体内出现dU时，则可能导致患者基因组的不稳定，加速这些患者病情的发展。显然，精准检测dU在DNA中的分布情况，将有助于评估人类个体的生理学机能和疾病的预后。

然而，寻找DNA中dU的精确位置如同大海捞针，属于科学难题。我国学者经过多年的探索，最终发明了优越的单碱基分辨率的dU测序技术。形象地说，这项测序技术首先需要研究人员找到一个合适“钩子”——一种名为UdgX的新型糖苷酶。UdgX能够将DNA的dU切除，形成一个缺口，并同时与对应的核糖形成共价键，最终将其捕获。作为“钩子”的UdgX“钓”到含dU的DNA片段后，还需要进一步确定dU位置。接下去，研究人员发挥DNA高保真聚合酶特性。这个酶就如同行驶在DNA轨道上的列车，当碰到被UdgX标记的dU的缺口时，会被动地原地“停车”。然后，研究人员结合高通量测序技术，将“停车”信号放大，最终在单个碱基的水平上精确地定位dU在DNA乃至基因组上的位置。

“一句话而言，这是依靠UdgX并结合DNA高保真聚合酶的dU测序技术。”中国科学院院士、新葡的京集团3512vip网站陈义汉教授解释说，从此，一个基于UdgX的在单碱基分辨率水平上的dU检测技术（Ucaps-seq）诞生了；基于该技术，今后可以像检测DNA中的A、T、G和C那样精确地检测DNA中的dU。

Ucaps-seq测序技术是国际上第一个酶法检测DNA中的dU碱基的技术，现存的dU测序技术均为化学法。酶法测序技术优于化学法测序技术，不仅灵敏性好、特异性强和分辨率高，而且效率高、成本低，很少发生假阳性，也很少受到干扰因素的影响。研究人员利用该技术还做了进一步的验证和探索工作。他们首先在合成的DNA探针模型上验证了Ucaps-seq测序技术的原理，然后在诱变后的癌症细胞和B细胞中验证了Ucaps-seq测序技术的单碱基分辨率效能，最后还应用该技术对基因编辑脱靶进行了评估，发现Ucaps-seq测序技术对基因编辑脱靶具有强大的识别能力。

作者：李蕾 黄艾娇

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